1前言
玉米飼料是一種極具開發潛力的蛋白質原料,不但可以緩解我國蛋白質資源缺乏的現狀,而且還可以降低飼料成本,提高畜禽養殖經濟效益。玉米飼料不僅蛋白質含量高,還含有多種微量元素,各種微量元素對動物生長發育的作用各不相同,其中磷元素對動物骨骼系統的發育及維持具有重要作用,同時還是許多器官的有機組成成分,其含量也是作為評價飼料營養品質的重要指標。根據國家標準(GB/T 6437-2018),我們采用微波消解法對玉米飼料進行消解,采用紫外可見熒光分光光度法對玉米飼料中的磷含量進行分析測定,實現了對玉米飼料中磷含量的有效檢測。
2儀器與試劑
2.1儀器
新儀TANK PLUS微波消解儀,i5紫外可見分光光度計,趕酸器,分析天平(十萬分之一)
2.2試劑
硝酸(68%),氫氟酸(40%),磷酸二氫鉀,偏釩酸銨,鉬酸銨
3實驗方法
3.1磷標準儲備液配制
取磷酸二氫鉀在105℃烘箱中干燥1h,于干燥器中冷卻,稱取0.2195g磷酸二氫鉀溶解于水中,轉移至1000 mL容量瓶,加入3mL硝酸加水稀釋至刻度,搖勻于4℃環境下保存。
3.2釩鉬酸銨顯色劑配制
稱取1.25g偏釩酸銨于200mL水中加熱溶解,冷卻后加入250mL硝酸,另稱取25g鉬酸銨于400mL水中加熱溶解,冷卻后將兩種溶液混合,加水稀釋至1000mL,避光保存,若生成沉淀則不能使用。
3.3磷標線工作液的制備
準確移取磷標準儲備液0mL、2mL、5mL、10mL、15mL于50mL容量瓶中,加入釩鉬酸銨顯色劑10mL,加水稀釋至刻度,搖勻,常溫下放置10min以上,以0mL磷標準溶液為參比,用1cm比色皿在400nm波長下用i5紫外可見分光光度計測各溶液的吸光度。以磷含量為橫坐標,吸光度為縱坐標,繪制工作曲線。
3.4微波消解玉米
使用硝酸作為實驗的消解試劑,稱取四種玉米樣品0.25g(精確至0.01mg)于消解罐,每種玉米飼料平行兩組實驗,隨同添加試劑空白,加入8mL硝酸,靜置5min左右,組裝消解罐,按照如下設置參數進行實驗:
階段
|
爬坡時間/min
|
壓力/MPa
|
溫度/℃
|
保溫時間/min
|
1
|
7
|
3.5
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150
|
2
|
2
|
3
|
3.5
|
170
|
2
|
3
|
5
|
3.5
|
190
|
20
|
實驗結束后,待冷卻至60℃以下,將消解罐轉移至通風櫥中,緩慢打開罐蓋靜置5min, 150℃趕酸至剩余液體0.5mL左右,加水定容至50mL容量瓶,繼續移取6mL溶液轉移25mL容量瓶,加入5mL顯色劑,定容至25mL,測試吸光度,計算磷含量。
3.5實驗數據
濃度/ppm
|
吸光度
|
0
|
-0.001
|
2
|
0.177
|
5
|
0.470
|
10
|
0.906
|
15
|
1.357
|
名稱
|
編號
|
取樣量/g
|
濃度/ppm
|
磷含量/%
|
玉米
|
1
|
0.2515
|
4.602
|
0.229
|
0.2523
|
4.790
|
0.238
|
2
|
0.2509
|
4.344
|
0.216
|
0.2502
|
4.251
|
0.211
|
3
|
0.2517
|
5.074
|
0.252
|
0.2511
|
5.313
|
0.264
|
4
|
0.2502
|
5.351
|
0.266
|
0.2528
|
5.261
|
0.260
|
空白
|
/
|
0.001
|
/
|
4結果
使用硝酸對玉米飼料樣品進行消解實驗,取樣量為0.25g,最高實驗溫度190℃,保溫20min,實驗最高壓力在2MPa左右,樣品可完全消解。使用紫外分光光度計法測試四種玉米飼料磷含量約在0.25%左右,符合常見玉米飼料的磷含量范圍。